青霉素是目前常用的抗生素之一，疗效高，但较易发生过敏反应后。对青霉素过敏的人，任何年龄、性别、任何给药途径（注射、口服、外用等）、任何剂量和任何制剂（钾盐、钠盐、长效、半合成青霉素等）均可发生过敏反应。过敏反应的发生率达3~6%。
因此，在使用各种剂型的青霉素制剂前，必须先做过敏试验。结果为阴性者方可用药，对接受青霉素治疗的病员，如停药3日以上须重新做过敏试验。过去已肯定有青霉素过敏史者不宜再作过敏试验。试验结果为阳性者禁用青霉素。同时在体温单、医嘱单、门诊卡、床头卡上醒目地注明青霉素阳性反应，并告知病员和家属。
（1）过敏反应的原因：过敏反应系抗原和抗体在致敏细胞上的相互作用而引起的。青霉素G本身与其所含的高分子聚合体（6—氨基青霉烷酸，即6—APA），降解产物（青霉烯酸、青霉噻唑酸），以及某些霉菌（青霉菌）均可成为半抗原。这些物质进入人体后和蛋白质或多肽分子结合成全抗原，可使T淋巴细胞致敏，从而作用于B淋巴细胞的分化增殖，转变成浆母细胞和浆细胞，而产生相应的抗体；此种抗体一般为IgE（免疫球蛋白E），它是一种亲细胞抗体，可吸附于组织肥大细胞或白细胞（嗜碱性粒细胞）表面，使机体对抗原处于致敏状态。当机体再次接触该抗原时，抗原即和肥大细胞及白细胞表面的IgE相结合而发生作用，导致肥大细胞破裂，释放出组织胺，慢反应物质（SRSA），缓解肽等血管活动性物质，作用于效应器官。
青霉素过敏反应多发生在过去用过青霉素或青霉素接触者，有变态反应性疾病或有药物过敏史者，皆易发生过敏反应。但临床上也有首次用药，即发生严重过敏反应，其原因可能和下列有关：
① 青霉素高分子聚合体（6—APA）性质很稳定，经煮沸灭菌处理后也不易破坏，因而使用注射过青霉素的注射器，是一致敏的来源。
② 青霉素降解产物可以空气吸入而致敏。
③ 皮肤丝状菌以及空气中的某些霉菌可能产生青霉素样物质。
过敏反应的好发部位分析：肥大细胞多分布于呼吸道、消化道的粘膜和皮下疏松结缔组织，尤其是血管周围，而产生　IgE抗体的浆细胞也多分布在呼吸道、消化道的粘膜固有层和扁桃体等处，故一旦发生过敏反应，抗原作用于有IgE吸附的　　肥大细胞，产生生物活性物质而出现的一系列症状表现在这些部位就尤为明显。例如：反应发生在皮肤可引起荨麻疹；发生在呼吸道可引起支气管哮喘和喉头水肿；发生在消化道可引起腹痛、腹泻。若全身受影响，则引起过敏性休克。
（2）皮内试验：
① 皮内试验药液的配制：皮内试验药液以每毫升含100~500u的青霉素G等生理盐水溶液，0.lml含10~50u。上海地区规定为20u为注入标准（北京为25u，天津为20u作标准）。具体配制方法如下：
A． 40万u青霉素瓶内注入2ml等生理盐水稀释为每毫升含20万u。
B． 取0.1ml青霉素溶液加等生理盐水至1ml，每毫升含2万u。
C． 取0.1ml青霉素溶液加等生理盐水至1ml，每毫升含2000u。
D． 取0.1~0.25ml青霉素溶液加等生理盐水至1ml，每毫升含200~500u。每次配制时均需将溶液混匀。
② 试验方法：取青霉素试验液0.1ml（含20~50u），作皮内注射，待20分钟后观察结果。
③ 皮内试验结果判断：
A． 阴性：皮丘无改变，周围不红肿，无红晕无自觉症状。
B． 阳性：局部皮丘隆起，并出现红晕，硬块直径大于1cm。或红晕周围有伪促、痒感，严重时可出现过敏性休克。
（3）青霉素快速过敏试验：无须注射，本法操作简便、无痛，试验时间短，效果好。
① 原理：青霉素分子结构中的酸根带负电荷，在水溶液中电离后，其负离子中含致敏原，当直流电通过时，青霉素负离子可能过负极透入皮下，与体内蛋白质结合变成抗原。对青霉素过敏的人，在电极板下的皮肤上可看到阳性反应现象。
② 用物：青霉素过敏反应快速试验器，青霉素试验液（每毫升含1万u），注射用水，0.25%普鲁卡因溶液，纱布。
③ 操作方法：
A． 离子导入部的三个头子分别用双层纱布包扎，以便吸附试验液。在前臂内侧用注射用水或蒸馏水浸湿的纱布擦净皮肤（忌用酒精），在电极板负极的方形头子上滴上配制好的青霉素试验液1滴，中间圆形正极头子上滴注射用水1滴，另一圆形正极头子上滴0.25%普鲁卡因试验液1滴（在注射普鲁卡因青霉素时用）。然后将电极板束于前臂内侧面，松紧度应适宜。
B． 开启电源开关，指示灯亮，电流表指示电流需在50~80uA之间，如电流过高或过低可调节电流表旋钮，电压维持在9~12V之间。待电流表指针稳定后，开动计时开关5分钟。当试验终末时，快速试验器自动报警，电流随即中断，关好开关，取下电极板，观察反应5分钟。
④ 皮肤试验结果判断：
A． 阴性：试验处皮肤的充血和压迹的粘程序，在青霉素及注射用水的电极板下均相同，在1~2分钟后即消失。全身无反应者为阴性。
B． 阳性：试验处皮肤出现明显突起的风团或大丘疹，周围充血或不充血，部分病员伴有臂部痒、刺、灼、压等感觉或全身反应，为强阳性。如局部出现皮肤小丘疹、荨麻疹则为阳性。少数病人皮肤上出现白斑，也为阳性表现。为了防止迟缓反应，须继续观察5分钟，并在注射前再观察一次。